Zestaw genotypowania brodawczaka ludzkiego (HPV) (metoda fluorescencyjna PCR)

A. zamierzone użycie

• Zestaw ten jest używany do jakościowego wykrywania ludzkiego brodawczaka o wysokim ryzyku i niskiego ryzyka (HPV).

• HPV wysokiego ryzyka obejmuje typ 16,18,26,31,33,35 39,45,51 52 53 56,58,59,66,68,73,82;  

• HPV niskiego ryzyka obejmuje typ 6,11,40 42,43,44 44/55 54,57/71,61,70,72 81,84.

B. Zasada

• Ten odczynnik jest multipleksowym systemem testowym TAQMAN® QPCR opartym na sondzie fluorescencyjnym.

• Specyficzne startery i sondy są przeznaczone do wykrywania różnych rodzajów ludzkiego brodawczaka (HPV).

• Kontrola wewnętrzna (IC) jest stosowana jako metoda monitorowania w celu uniknięcia wyników testów fałszywie ujemnych.

• System enzymu/DUTP UDG jest dodawany w celu degradacji produktu amplifikacji, aby uniknąć fałszywie pozytywnych wyników.

• Ten zestaw jest w pełni zmieszanym systemem liofilizowanym. Enzym TAQ, enzym UDG, bufor reakcji, specyficzne startery i sondy zostały wstępnie umieszczone w odczynnikach.

C. Komponenty

Conponenci	8 próbek/zestaw	24 próbki/zestaw	Składnik
Liofilizowany odczynnik HP04	8 × 8 rur pasków	24 × 8 rurki	Specyficzny starter i sondy do wykrywania docelowych patogenów, mieszanki DNTP/DUTP, MG2+, polimerazy TAC i enzymu UDG
Bufor lizy HPV	1 ml × 1 rurka	Rurka 2,5 ml × 1	Środek aktywny powierzchniowy, zrównoważony roztwór soli
Kontrola pozytywna HPV	Rurka 400 ml × 1	Rurka 400 ml × 1	Plazmid zawierający każdą docelową sekwencję genów
Kontrola negatywna HPV	Rurka 400 ml × 1	Rurka 400 ml × 1	Plazmid zawierający wewnętrzną sekwencję kontroli
Rozwiązanie rozpuszczającego się	1 ml × 1 rurka	1 ml × 3 rurki	Stabilizator

D. Przechowywanie i okres trwałości

1). Transport w temperaturze pokojowej poniżej 37 ℃ (＜ 1 miesiąc).

2). Przechowywane na poziomie -20 ℃ ± 5 ℃ przez 1 rok.

3). Powtarzające się zamrażanie i rozmrażanie nie powinny przekraczać 7 razy.

E.  Przegląd procesu testowania

F. Wzmocnienie PCR

1. Umieść rurki reakcyjne do instrumentu PCR i ustaw nazwy każdej reakcji w odpowiednim kolejności.

2. Wybierz kanały fluorescencyjne FAM, VIC/HEX, ROX i CY5 do wykrywania. Odpowiednie cele każdego kanału fluorescencyjnego pokazano w poniższej tabeli:

   
   

   
   

Lokalizacja	Fam	Vic/Hex	Rox	Cy5
Cóż 1	HPV typ 16	HPV Typ 18	HPV Typ 26	Kontrola wewnętrzna (IC)
Well 2	HPV Typ 31	HPV Typ 33	HPV Typ 35	HPV Typ 39
Cóż 3	HPV Typ 45	HPV Typ 51	HPV Typ 52	HPV Typ 53
Dobrze 4	HPV Typ 56	HPV Typ 58	HPV Typ 59	HPV Typ 68
Well 5	HPV Typ 66	HPV Typ 73	HPV Typ 82	HPV Typ 81
Cóż 6	HPV typ 6	HPV Typ 11	HPV typ 40	HPV typ 42
Dobrze 7	HPV Typ 43	HPV Typ 44/55	HPV Typ 54	HPV Typ 61
Dobrze 8	HPV Typ 57/71	HPV Typ 70	HPV Typ 72	HPV Typ 84

G.  Analiza i interpretacja wyników

Zapoznaj się z instrukcją obsługi.

H. Specyfikacja wydajności

1. Ograniczenie wykonywania: 1000 kopii/ml

2. Precyzja: Współczynnik zmienności (CV,%) wartości CT precyzji wewnątrz partii/między partią wynosi ≤5%.

3. Dokładność: wskaźnik zgodności ujemnego/dodatni odniesienie: 100%.

4. Specyficzność: Organizmy Farget zostały przeanalizowane w silico pod kątem potencjalnej reaktywności krzyżowej ze starterami lub sekwencjami sondy.

Homologia z innymi gatunkami jest poniżej 80%.

Analiza specyficzności wykazała, że ​​nie ma reakcji krzyżowej z Trichomonas vaginalis, Neisseria gonorrhoeae, chlamydia trachomatis, Gardnerella vaginalis, haemophilus ducreyi, candida albicans, streptococcus agalactiae, moczopazja moczosticum, urwas, mycoplasma generis, mycoplapsma generis, mycoplapsma generis, mycoplasma generis, mycoplasma generis, mycoplasma generis, mycoplasma generis, mycoplasma generis, mycoplasma generis, mycoplasma generis, mycoplasma generis, mycoplasma generis, mycoplasma generis, mycoplasma generis, mycoplasma generis, mycoplasma generis, mycoplasma generis, mycoplasma generis Treponema pallidum, wirus herpes simplex typu 1 i 2.

I. Może ci się spodobać