Liczba wyświetleń:0 Autor:Edytuj tę stronę Wysłany: 2022-05-25 Źródło:Ta strona
Przygotowanie roztworu złota koloidalnego do Test antygenowy przyjmuje metodę redukcji cytrynianu trisodu w celu przygotowania roztworu złota koloidalnego. Weź 1000 ml ultraczystej wody i podgrzej ją do wrzenia na mieszadle magnetycznym, dodaj 40 ml 1% roztworu kwasu chlorozłotowego, gdy roztwór ponownie się zagotuje, szybko dodaj 36 ml 1% roztworu cytrynianu trójsodowego, kontynuuj gotowanie, gdy kolor zmieni się roztwór zmieni kolor na fioletowy po 5 minutach, wyłącz grzejnik i po ochłodzeniu przywróć pierwotną objętość ultraczystą wodą. Średnią średnicę i potencjał Zeta cząstek złota koloidalnego zmierzono za pomocą analizatora wielkości nanocząstek i przechowywano w temperaturze pokojowej w ciemności. Jaka jest zatem informacja na temat przygotowania roztworów złota koloidalnego do testu antygenowego? Spójrzmy.
Oto lista treści:
l Przygotowanie koniugatów znakowanych złotem koloidalnym
l Przygotowanie szybkich pasków testowych antygenu
l Minimalny limit wykrywalności
l Test stabilności
Do dwóch czystych zlewek należy pobrać odpowiednio 100 ml złota koloidalnego testu antygenowego, zgodnie z zoptymalizowanymi, oznaczonymi warunkami pH, dodać 3,3 ml i 2,1 ml węglanu potasu o stężeniu 0,1 mol/l w celu ustalenia pH, mieszać mieszadłem magnetycznym przy 300 obr./min. min przez 10 min i dodać mysie przeciwciało monoklonalne przeciwko białku N i białko DNP-BSA po 1 mg i mieszano przez 15 minut; Dodano 2 ml 10% roztworu BSA i 2 ml 10% roztworu BSA i mieszanie kontynuowano przez 20 minut; po wymieszaniu roztwór złota koloidalnego do testu antygenowego przeniesiono do dwóch probówek wirówkowych o pojemności 50 ml, ustawiono parametry wirówki na 9000 obr./min, 20 min i 4°C, po czym przeprowadzono wirowanie. Po odwirowaniu ostrożnie wyjąć probówkę wirówkową, nie wstrząsać, usunąć supernatant pipetą, zebrać osad, rozpuścić go rozcieńczalnikiem koniugatu do objętości 10 mL i przechowywać w temperaturze 4°C w ciemności. Średnią średnicę i potencjał Zeta cząstek koniugatu złota koloidalnego w teście antygenowym zmierzono za pomocą analizatora wielkości nanocząstek.
Podkładkę próbną równomiernie pokryto roztworem do obróbki próbki, a ilość powłoki każdego włókna szklanego wynosiła 30 ml i suszono w temperaturze 50°C przez 24 godziny. Rozcieńczyć szybki test antygenowy znakowane złotem koloidalnym mysie przeciwciało monoklonalne przeciwko białku N i koniugat białka DNP-BSA znakowany złotem koloidalnym z rozcieńczalnikiem koniugatu, stosunek objętościowy wynosi odpowiednio 18% i 20%, a następnie potraktuj rozcieńczonym koniugatem złota koloidalnego, podkładka sprzęgająca była równomiernie pokryte cieczą, ilość powłoki każdego włókna szklanego wynosiła 30 ml i suszono je w temperaturze 45°C przez 24 godziny. Mysie przeciwciało monoklonalne przeciwko białku N i królicze przeciwciało poliklonalne przeciwko DNP rozcieńczono PBS zawierającym 0,01 mol/l pH 7,4 i 5% trehalozę do stężenia odpowiednio 2,0 mg/ml i 1,0 mg/ml. Jako linię detekcji (linia T) i linię kontroli jakości (Cline), przeciwciało wychwytujące powlekano membranę nitrocelulozową (membrana NC) i suszono w temperaturze 45°C przez 48 godzin. Przygotowaną folię NC, podkładkę z koniugatem, podkładkę z próbką i podkładkę pochłaniającą wodę naklejono kolejno na dolną płytkę PCV, pocięto za pomocą krajarki na paski o szerokości 3 mm, włożono do etui na karty i zapakowano w torebkę z folii aluminiowej. Podczas badania włóż wymaz z nosogardła do rurki do podnoszenia wypełnionej roztworem ekstrakcyjnym (10 mmol/LPBS, pH 7,4, 1% NP-40) i dodaj kroplami 3 krople (100 μL) do otworu na próbkę testu karta po ekstrakcji przez 15s. Czas reakcji 15 minut na interpretację wizualną. Zarówno linia T, jak i Cline testu antygenowego są dodatnie, linia T nie jest zabarwiona, Cline jest ujemna, Cline nie jest zabarwiona, co wskazuje, że pasek testowy jest skuteczny i należy go ponownie przetestować.
Badania minimalnej granicy wykrywalności przeprowadzono z kulturami wirusów zabitymi ciepłem. Eluat z wymazów z nosogardła od osób zdrowych zastosowano jako matrycę ujemną w teście antygenowym. Najpierw przeprowadzono 10-krotne rozcieńczenie gradientowe. Po negatywnym wyniku szybkiego testu antygenowego, poprzednie stężenie było wówczas 2-krotnym rozcieńczeniem gradientowym i nie mniej niż 19 razy na 20 testów było pozytywnych. Jako minimalną granicę wykrywalności odczynnika przyjęto poziom stężenia (≥95%).
Umieść przygotowaną kartę z gotowym odczynnikiem do testu antygenowego w piekarniku o temperaturze 50°C i co dwa tygodnie testuj za pomocą substancji kontroli jakości o wysokim i niskim stężeniu. Powtórzyć test 3 razy dla każdej próbki. Różnica w głębokości pasma między odczynnikiem przyspieszonego niszczenia w wysokiej temperaturze a odczynnikiem kontrolnym przez 1 tydzień i 8 tygodni.
Powyższe informacje dotyczą przygotowania roztworu złota koloidalnego do testu antygenowego. Jeśli jesteś zainteresowany Szybki test antygenowy na obecność wirusa COVID-19, Szybki test na antygen SARS-CoV-2, możesz się z nami skontaktować. Nasza strona internetowa to www.bioteke.cn.
